Анализ крови РПГА — реакция пассивной гемагглютинации

Анализ на сифилис – исследование, которое назначают некоторым категориям пациентов в целях профилактики и выявления заболевания. Для прохождения тестирования необходимо обратиться к лечащему врачу, чтобы он выдал направление.

Общая информация

Сифилис — болезнь, вызываемая специфической бактерией, бледной трепонемой.

Возбудитель передается от больного человека к здоровому при незащищенном половом контакте, реже встречаются бытовой путь заражения или передача инфекции от больной матери к ребенку в процессе вынашивания и родов.

Первым симптомом сифилиса является возникновение твердого шанкра — эрозии или небольшой язвы, локализованной в месте проникновения трепонемы в организм. Чаще всего она расположена на слизистых половых органов, в промежности, однако может появляться и на других частях тела, даже в ротовой полости. Спустя некоторое время шанкр самостоятельно исчезает, и если пациент не обращался за врачебной помощью, он начинает думать, что здоров.

Общая информация

Спустя 1,5-2 месяца после заражения на теле появляются сыпь в виде небольших пятен розового цвета. Это вторичная стадия сифилиса, которая без лечения может продолжаться несколько лет. После этого на коже образуются специфические узлы — гуммы и рубцы, поражаются внутренние органы. Чаще всего страдает желудочно-кишечный тракт и печень, сердечно-сосудистая система.

Наиболее грозным осложнением заболевания является нейросифилис. Это специфическое поражение головного и спинного мозга, характеризующееся параличами, нарушением функции тазовых органов, тремором, психическими расстройствами (маниакально-депрессивные психозы, деменция).

Для того чтобы не допустить опасных осложнений, важно вовремя диагностировать сифилис и начать антибактериальную терапию.

Описание анализа

Не все знают, как называется анализ крови на сифилис. Для диагностики этого заболевания чаще всего используют иммунологическую реакцию Вассермана или RW.

Данный метод исследования относится к группе реакций связывания комплемента. Несмотря на то, что в современной медицине появилось множество иных способов исследований крови больного, все методы традиционно называют реакцией Вассермана.

В кровь человека, заразившегося сифилисом, попадает возбудитель — бледная трепонема, которая в своем составе имеет кардиолипин. После этого иммунная система больного начинает вырабатывать специальные антитела к этому антигену.

Если в крови человека обнаруживаются антитела, реакция Вассермана дает положительный результат, следовательно, можно утверждать о наличии у пациента заболевания.

Описание анализа

Иногда анализ на сифилис может показать ложноположительный результат. В этом случае доктор направляет пациента на прохождение повторного анализа и дополнительных исследований, необходимых для диагностики другого заболевания. Ложноположительный результат может встречаться:

  • у больных с инфекционным заражением (пневмонией, вирусным гепатитом, туберкулезом и др.);
  • у пациентов с онкологическими и аутоиммунными заболеваниями;
  • у женщин сразу после родов или в период менструации;
  • у пациентов сразу после вакцинации;
  • во время беременности;
  • у лиц, принимающих наркотики и алкоголь.

Важно! Отрицательный результат RW говорит о том, что пациент здоров. Однако у 3-5% здоровых людей реакция может быть ложноположительной.

Анализ на сифилис отрицательный: что это значит. – Венеролог

Трепонемы вызывают воспаление лимфоузлов и оттуда прорываются в кровь

Казалось бы, видна характерная картина заболевания, но исследования не дают положительный результат. В статье мы разберемся, почему анализ на сифилис может быть ложноотрицательным.

Анализ на сифилис

Сифилис — самая «известная» инфекция, передающаяся половым путем. Мы не зря взяли слово в кавычки, так как при кажущейся изученности и разработанном алгоритме диагностики, до сих пор случаются ошибки в своевременном обнаружении заболевания.

Это происходит потому, что сифилис — многоликая болезнь, которая научилась маскироваться под другую патологию. В этой связи лабораторная диагностика играет первостепенную роль.

Общие сведения о заболевании

Возбудитель болезни — бледная трепонема, которая названа так из-за способности не воспринимать анилиновые красители. Поэтому, она всегда остается белой, что используют как один из методов диагностики сифилиса. Пути проникновения инфекции в организм очень многообразны:

  1. половой путь — самый распространенный, причем, не только традиционный, но и в результате анального или орального секса;
  2. контактно-бытовой — через общие бытовые принадлежности (полотенца, постельное белье);
  3. при переливании крови;
  4. через слюну (при локализации первичного очага инфекции во рту больного);
  5. внутриутробное заражение через плаценту или сразу после родов через грудное молоко.

В месте внедрения возбудителя на коже или слизистой образуется первичный очаг (так называемый твердый шанкр). Дальше возбудитель заселяется по всему организму, поражая многие органы (нервную систему, кости, сердце, легкие и другие).

Поскольку твердый шанкр это безболезненное и не всегда большое образование (описаны элементы всего 5 мм в диаметре), на этой стадии сифилис легко пропустить.

А когда инфекция приобретает генерализованную форму, то симптомы очень разнообразны, маскируются под воспалительный процесс соответствующего органа.

Читайте также:  "Милдронат" в спорте: инструкция по применению, дозировка

Лабораторная диагностика инфекции

Впервые лабораторный тест на бледную трепонему провел Август Вассерман еще в 1906 году. С тех пор появилось множество методик подтверждения заболевания, но все они по традиции обозначаются двумя буквами RW (реакция Вассермана).

Трепонемные исследования

Почему нужно сдавать анализ на сифилис повторно? Часто трепонемные исследования используются в качестве контрольного анализа, чтобы подтвердить или опровергнуть диагноз после нетрепонемного теста. Сомнительный результат первого теста означает, что придется сдать анализы на сифилис повторно.

Реакция пассивной агглютинации (РПГА, РНГА). Анализ на сифилис РПГА является быстрым методом исследования, результат можно узнать уже через час. Чтобы проверить кровь на наличие сифилиса по РПГА-тесту, анализ проводится спустя месяц после контакта с больным. Гемагглютинация может давать ложноположительный результат при мононуклеозе и ряде других заболеваний.

Для диагностики болезни на ранних стадиях применяется Реакция иммунофлюоресценции (РИФ-тест). Анализ крови из пальца или вены с помощью РИФ может выявить заболевание спустя 1,5-2 месяца после контакта с больным.

Во время проведения РИФ-теста антитела четко выделяются свечением в ультрафиолетовом свете.

При беременности или наличии системных заболеваний соединительной ткани (ревматоидный артрит и пр.) РИФ-тест может оказаться ложноположительным. Поэтому очень важно предоставить врачу достоверную информацию о себе и медицинскую карту. Положительная реакция обозначается знаками «+» от одного до четырех.

Реакция иммобилизации бледной трепонемы, также известная как РИБТ-тест пользуется высокой популярностью. Серодиагностика по методу РИБТ достоверна в 99% случаев. Однако анализы крови могут быть назначены только спустя 12 недель после контакта с носителем болезни.

РИБТ-исследование проводится спустя 3,5-4 месяца после возможного заражения. Заболевание определяется с вероятностью 99%.

Иммуноблотинг способен дать 100% результат и реагирует даже на очень маленькое содержание антител в крови пациента.

Иммуноферментный анализ или ИФА способен выявить болезнь уже спустя 3 недели после возможного заражения. Достоверность положительного результата составляет 98%. Этот анализ называют одним из самых точных. Как же очистить кровь от сифилиса? Как лечат сифилис какие нужны повторные обследования скажет квалифицированный врач. Не занимайтесь самолечением!

О ложноположительных значениях

Но, несмотря на высокую чувствительность и специфичность этого теста, также при проведении РПГА на сифилис возможны ложноположительные значения. Они возникают нечасто, не более чем в 2,6% случаев, и появляются при циркуляции в крови пациента антител, очень похожих на сифилитические, но не являющиеся ими. Это могут быть аутоантитела, и чаще всего такие «сюрпризы» подбрасывает системная красная волчанка.

Также те заболевания, которые вызываются другими представителями трепонем, или спирохет, могут приводить к ложноположительным значениям, например, болезнь Лайма, которую вызывает «близкая родственница» сифилиса Borrelia burgdorferi. О диагностике болезни Лайма, или клещевого боррелиоза, можно прочитать здесь. В некоторых случаях, к таким искажениям приводит онкологическая патология, состояние беременности, и даже вялотекущий острый инфаркт миокарда. В последнем случае в кровь попадают частицы некротизированной сердечной мышцы, которые по своей структуре аналогичны кардиолипиновому антигену, он применяется для постановки реакции Вассермана, и извлекается из сердца крупного рогатого скота.

Также причиной ложноположительных результатов могут быть случаи внутривенной наркомании, ВИЧ-инфекция и вирусные гепатиты B и C, лептоспирозы и возвратный тиф, а также заболевания, которые встречаются в жарких странах и вызываются трепонемами — пинта, фрамбезия, беджель. В редких случаях, у пациентов с низким иммунитетом могут активизироваться трепонемы, которые относятся к сапрофитам и обитают в полости рта. Также туберкулез и инфекционный мононуклеоз могут быть причиной таких реакций, как и в случае обширной политравмы и многочисленных переломов.

Такие ложноположительные реакции необходимо перепроверять через некоторое время, обычно они исчезают в течение полугода, например, после разрешения беременности или в течение более длительного времени.

Расшифровка результатов

Существует следующая шкала оценок для результатов тестов:

  • отсутствие реакции свидетельствует о том, что анализ на сифилис отрицательный;
  • 1 или 2 креста – результат неясен, требуется повторное тестирование или проведения другого метода диагностики;
  • 3 креста – положительное тестирование, скорее всего у пациента есть в крови возбудитель сифилиса;
  • 4 креста – положительный анализ на сифилис.

После анализа биоматериала лаборант указывает количество крестов на бланке. Пациент после получения результатов должен обратиться к лечащему врачу, чтобы он определил форму сифилиса.

В настоящее время сифилис легко излечим, случаев заболевания становится меньше. Он опасен тем, что при отсутствии терапии вызывает ряд осложнений, например, первичную сифилому. Поэтому рекомендуется периодически проводить полный скрининг организма, лабораторные тестирования для выявления различных инфекций.

Нетрепонемные методы

Эти тесты позволяют с большой точностью выявить в крови и других биоматериалах больного антитела, вырабатываемые при попадании в организм инфекционного возбудителя.

Читайте также:  Мексидол инструкция по применению уколы внутривенно струйно

Реакция Вассермана – самый распространенный метод диагностики

Реакция Вассермана

Тест реакция Вассермана или РВ считается наиболее распространенным и известным методом определения сифилиса. При этом используется процесс связывания комплемента (РСК). На сегодняшний день существует масса новых методик, но большинство из них основаны именно на реакции Вассермана.

После попадания в организм трепонемы иммунитет синтезирует специальные антитела или, как их еще называют, маркеры. Происходит это вследствие вторжения болезнетворных микроорганизмов. РВ указывает на наличие таких антител, что свидетельствует об инфицировании больного.

Во время диагностики лаборант использует такое понятие, как реакция гемолиза. При этом отмечается взаимодействие двух субстанций. К ним относят эритроциты барана и гемолитическую сыворотку. Сыворотка получается путем иммунизации кроля красными кровяными телами барана. Снижается активность этой биологической жидкости с помощью нагревания.

Результаты реакции Вассермана зависят от того, произошел ли гемолиз. В биологическом материале, где антител нет, гемолиз проходит нормально, реакции на маркеры не отмечается. Если же маркеры присутствуют, красные кровяные тела вступают во взаимодействие с ними и гемолиз не происходит.

Чтобы провести такое исследование, все компоненты помещают в чашку Петри в равных частях. После этого сыворотку, комплимент и антиген подвергают прогреванию. В пробу добавляют сыворотку и красные кровяные тела барана. Пробирку держат при температуре около 37 градусов до наступления гемолиза в контрольном образце, содержащем физраствор вместо антигена.

Для выполнения реакции Вассермана берут готовые антитела. Обычно их упаковка содержит информацию о технике их разбавления. Положительный результат обозначается в виде плюса. Готовый анализ может фиксировать разное количество этих обозначений:

  • «+» – сомнительный результат. Один плюс ставится, если гемолиз прошел с незначительной задержкой;
  • «++» – слабовыраженный. При этом гемолиз проходит с частичным замедлением;
  • «+++» – положительный анализ. Такое количество плюсов ставят при значительной задержке реакции гемолиза;
  • «++++» – высоко положительный. Здесь гемолиз задерживается сильно.

Положительный анализ свидетельствует о венерическом заболевании

Если анализ отрицательный, гемолиз полностью отсутствует. В виде исключения выступают случаи ложноположительного ответа. Происходит это у пациентов, у которых фосфолипид кардиолипин входит в состав клеток, а иммунная система организма не вырабатывает антитела к «своему» кардиолипину.

Реже отмечаются исключительные случаи, когда тест дает положительную реакцию у абсолютно здоровых людей. Это может быть связано с перенесением тяжелых патологий, беременностью или ослабленным иммунитетом.

Тест с толуидиновым красным и метод плазменных реагинов

Метод плазменных реагинов или RPR относится к аналогичным методикам с реакцией Вассермана. Его применение показано в таких случаях:

  • проведение обследования лиц, у которых симптомы не проявляются или слабо выражены;
  • во время профилактики сифилиса;
  • для проверки донорской крови.

Тест с толуидиновым красным эффективен для выполнения контроля течения назначенной терапии. Когда болезнь отступает, его показатели снижаются, при рецидиве наблюдается обратная картина.

РМП и РСК

Реакция Вассермана во время диагностики проводится довольно редко. Она успешно заменяется методом РСК. С его помощью удается выявить сифилис через 60 суток после попадания в организм болезнетворных микроорганизмов. Если заболевание имеет вторичную форму, тест дает положительный ответ практически во всех случаях инфицирования.

Метод микропреципитации или РМП также имеет действие, аналогичное реакции Вассермана. Проводится этот вид диагностики быстро. Здесь сдача крови осуществляется из пальца. В случае заражения метод покажет положительную реакцию через месяц после инфицирования.

При анализе МРП кровь берут из пальца

РИМ иногда дает ложноположительные результаты. Это может произойти на фоне таких патологий:

  • пневмония;
  • токсическое или пищевое отравление;
  • инсульт, инфаркт;
  • туберкулез;
  • бруцеллез;
  • онкологические болезни;
  • сахарный диабет;
  • геморрой;
  • ревматоидные артриты;
  • мононуклеоз и другие.

При сомнительных результатах пациенту обычно назначают трепонемные тесты, которые помогают прояснить клиническую картину.

Ложноположительные и ложноотрицательные реакции на сифилис

Если проведение РИБТ показало положительный результат, то необходимо провести и другие тесты для подтверждения диагноза сифилиса.

И только после уточнения диагноза начать эффективное и адекватное лечение.

Нужно всегда помнить об основном предназначении РИБТ – уметь интерпретировать ложноположительные результаты других КСР.

Для РИБТ характерна значительно поздняя положительность, чем КСР.

Но зато у РИБТ самая высокая специфичность из всех КСР.

Ложноположительной серологической реакцией на сифилис (ЛПР) считают наличие положительных показателей серологических реакций.

Ложноположительные и ложноотрицательные реакции на сифилис

Например, РИБТ сыворотки крови людей, в данный момент и в анамнезе не имеющих никакого отношения к сифилису.

Имеется в виду, что бледная трепонема отсутствует в организме, и ее никогда не было, а анализы серопозитивны.

Причины ЛПР различны:

  • технические погрешности и плохое качество реагентов
  • беременность и месячные
  • различные инфекционные заболевания (типа пневмококковой пневмонии, скарлатины, инфекционного эндокардита, туберкулёза, лепры, гриппа, герпеса, малярии и тому подобных)
  • недавно перенесенный инфаркт миокарда
  • вакцинация
  • аутоиммунные заболевания
  • онкопатология
  • хроническая патология печени
  • заболевания органов ССС и эндокринной системы
  • заболевания крови
  • хроническая патология легочной ткани
Читайте также:  Болезни домашней птицы — справочник

Проведение различных методик для диагностики сифилитической инфекции обусловлены их различной специфичностью и чувствительностью.  

На эти показатели влияет форма и стадия сифилиса.

Ложноотрицательный результат серологических реакций на обнаружение сифилиса возможен во время вторичного сифилиса (феномен прозоны – неразведенная сыворотка).

Или у лиц с иммунодефицитом (например, с ВИЧ-инфекцией).

Если получен отрицательный результат серологического исследования, то нужно помнить, что бледная трепонема проникает и размножается во всех органах человеческого организма и на самом деле она в теле остается.

Надежнее всего бледную трепонему искать в лимфоузлах, там она есть практически всегда.

Если получены положительные результаты исследований, то их тоже нужно повторить.

Ложноположительные и ложноотрицательные реакции на сифилис

Чтобы результаты исследований были наиболее достоверными их, при любом результате, нужно повторить дней через пять – семь.

Диагностируют сифилис и осуществляют сероконтроль во время и после курса лечения комплексом серологических реакций (КСР).

Ложноположительными результатами, уточнением диагноза, подтверждением отрицательного результата другого исследования после проведенной терапии и при отмене наблюдения за больными, в анамнезе перенесшими сифилис, занимаются с помощью РИБТ.

При положительной РИБТ диагноз сифилиса подтверждается или опровергается другими тестами и осуществляется необходимое лечение, если есть такая необходимость.        

Для сдачи и расшифровки анализа РИБТ на сифилисобращайтесь к автору этой статьи – венерологу в Москве с многолетним опытом работы.

РПГА как метод переподтверждения

Поэтому в том случае, если у пациента при реакции Вассермана выявлено положительное ее значение, то для подтверждения или опровержения результатов RW необходимо выполнить реакцию пассивной гемагглютинации. Специфичность РПГА составляет от 96 до 100%. Даже при скрытом сифилисе без всяких проявлений она может также поставить диагноз с практически 100% вероятностью.

РПГА как метод переподтверждения

Поскольку правила диагностики сифилиса обязательно требуют переподтверждения первичного диагноза другим методом, то в том случае, если первичным методом диагностики является сама РПГА, то ее тоже необходимо переподтвердить, несмотря на ее высокую чувствительность, но уже только с помощью другого метода. И тогда используется тоже трепонемный тест, но только другой, например, нужно расшифровывать новые значения методом иммуноферментного анализа (ИФА).

Какие анализы сдаются для выявления инфекции?

Основу лабораторной диагностики венерической патологии составляют тесты, направленные на выявление специфических антител, синтезируемых костным мозгом в ответ на повреждающее действие бледных трепонем.

Поскольку основным биологическим субстратом для диагностики сифилиса является сыворотка крови (реже – плазма), все анализы объединяются под общим названием серологических тестов, которые делятся на трепонемные и нетрепонемные.

Особенности нетрепонемных тестов

Нетрепонемные анализы – используются для скринингового обследования и оценки эффективности проводимого венерологом лечения.

Нетрепонемные анализы основаны на взаимодействии не с возбудителем сифилитической инфекции, а с липидными комплексами, возникающими при разрушении его клеток. Во время химической реакции специфического реагента с находящимися в организме антителами формируются комплексы АГ-АТ (антиген-антитело), которые выпадают в осадок и доступны для оценки невооружённым глазом. Реакция считается:

  • отрицательной (-), если хлопьев и любых видов осадка нет;
  • слабоположительной/сомнительной (+, ++), если обнаружены хлопья небольшого размера;
  • положительной (+++, ++++), если можно увидеть крупные хлопья в осадке.

Важно знать, что нетрепонемные тесты сохраняют ложноотрицательные значения на протяжении 1-1,5 месяцев после инфицирования. Первичная сифилома – первый признак классического течения сифилиса – обычно опережает положительные значения теста на 7-28 дней.

Несмотря на высокую скорость получения результатов обследования и дешевизну многих нетрепонемных тестов, результативность их остаётся невысока. Данные тесты способны диагностировать первичный сифилис в 75-90%, вторичный – в 100%, а третичный – не более чем в 30-50% случаев. Для подтверждения диагноза «сифилис» необходимо проведение специфических тестов, называемых в медицине трепонемными.

Реакция Вассермана

Какие анализы сдаются для выявления инфекции?

Реакция Вассермана (RW) – известный и проверенный временем тест для определения возбудителя сифилиса в крови. Он основан на получении сыворотки крови с инактивированным собственным комплементом. Затем подготовленный биоматериал делят на две части: одну из них обрабатывают сифилитическим антигеном, другую – кардиолипиновым.

Оценка результатов происходит по скорости гемолиза (разрыва мембраны и полного разрушения) эритроцитов:

  • полный (-) – отрицательный результат;
  • непродолжительная задержка (+) – сомнительный результат;
  • частичная задержка (++) – слабоположительный результат;
  • продолжительная/абсолютная задержка гемолиза (+++, ++++) – положительный результат.

Положительной RW становится через 2-3 недели после появления первичной сифиломы. Результативность теста при вторичной форме заболевания – 100%, при третичной –75%.

Особенности трепонемных тестов

Трепонемные анализы применяются для углубленной диагностики венерической инфекции, среди них выделяют:

  • РИФ (анализ, основанный на применении метода флюоресценции);
  • РИТ (реакция оценки обездвиживания живых Tr. pallidum);
  • ИФА (иммуноферментный анализ);
  • РСК (реакция, при которой происходит связывание иммунной системы комплемента);
  • РПГА (реакция пассивного «склеивания» форменных элементов);
  • метод иммуноблота.